TRAF基因和TAK基因的克隆方法

1、首先，在根据GenBank中已提交的鱼类TRAF6和TAKIcDNA序列的保守区设计兼并引物(TRAF6-F/TRAF6R;TAKI-F/TAK1-R)。

3、然后，通过BLAST比对分析后获得TRAF6和TAKI基因的核心片段，根据得到的核心片段设计RACE特异性引物(表1),利用巢式PCR扩增TRAF6和TAKI基因的5'和3'末端。

5、然后，进行序列比对和系统进化分析，利用EditSeq软件预测TRAF6和TAKI基因的开放阅读框(ORF)及可能编码的氨基酸序列。