1、首先，当转化子单菌落长至直径0.5~1mL时，每种类型酵母靶菌株挑取一个单菌落克隆子用来做接合实验。
2、然后，将挑取的多种单菌落克隆子加入到含有0.5mL 2XYPDA液体培养基的PA瓶中，旋转混匀以打算单菌落。
3、然后，在28~30C恒温条件下，在100r/min进行振荡培养12~24h。
4、然后，将菌液转移至1.5mL.离心管中，在12000r/min的条件下室温离心15s，弃上清，以1mL ddH2O重悬细胞，用微量移液器轻柔吹吸混匀。
5、然后，各取100PL 菌液涂于SD选择营养缺陷型/ 异亮氨酸-色氨酸(SD/-雉搽妤粲Leu-Trp)及选择营养缺陷型-色氨酸-异亮氨酸-组氨酸-腺嘌呤(SD/-皈其拄攥Trp-His-Leu-Ade)培养基平板上，30C恒温正置培养3~5d。
6、最后，SD/ -Trp-His-Leu-Ade培养基平板上得到的即为具有相互作用蛋白的接合子。
