1、离心并收集细胞，弃上清，用预冷的PBS清洗细胞两次。
2、加入70%乙醇，于4℃固定过夜，或-20℃保存（一般来讲1个月内都是没有问题的）。
3、离心收及细胞，以1mL的PBS清洗一次，加入500uLPBS（含50ug/mL的PI），100ug/mL RNase A，0.2% Triton X-100）。
4、4℃避光孵育30min。
5、用流式细胞仪检测，一般计数2-3万个。
6、用细胞周期拟合ModFit软件分析
1、分析时，使用FL2-W和FL2-A显示，去除联体细胞。
2、变异系数（CV）越小，峰形越好，越尖锐，能控制在5%左右最好，一般小于10%就可以了。
3、一般用400目筛网将黏在一起的细胞团滤掉，否则可能出现人为的多倍体干扰。
4、RNAse降解RNA，这样才能以荧光强度反映DNA的含量。
